測(cè)試儀器、輔助設(shè)備和培養(yǎng)基
選擇合適的浮游菌采樣器，包括采用無油的抽氣泵，較低的氣流流速和較大的采樣流量,以保證培養(yǎng)基表面的水分不被吹干。
本測(cè)試需要具備儀器、輔助設(shè)備和培養(yǎng)基如下:
a.浮游菌采樣器
b.培養(yǎng)皿
c.培養(yǎng)基
d.恒溫培養(yǎng)箱
e.高壓蒸汽滅菌器。
測(cè)試要點(diǎn)
1.必須按照測(cè)試儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定。使用校驗(yàn)合格,且在使用有效期內(nèi)的儀器。
2.測(cè)試儀器在未進(jìn)入被測(cè)區(qū)域時(shí)，若必需則先清潔表面,或在相應(yīng)的潔凈室內(nèi)準(zhǔn)備和存放(用保護(hù)罩或其他適當(dāng)?shù)赝庹直Ｗo(hù)儀器)。
3.在100級(jí)潔凈室內(nèi)用紙時(shí),上面應(yīng)蒙上一張透明不沾塵的覆蓋物，在100級(jí)潔凈室內(nèi)不能用鉛筆和橡皮。
4.使用測(cè)試儀器時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。
5.儀器開機(jī)，預(yù)熱至穩(wěn)定后，方可按儀器說明書的規(guī)定對(duì)儀器進(jìn)行校正，同時(shí)檢查采樣流量，并根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。
6.采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。
7.采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑。
8.采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少彎曲。
測(cè)試步驟
1.測(cè)試前，儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。
（1）采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜預(yù)先放在被測(cè)房間內(nèi)。
（2）用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
（3）采樣前，先用消毒劑清洗釆樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。
（4）采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí),應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。
（5）采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前,雙手用消毒劑消毒或戴無菌手套操作。
（6）采樣儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開啟浮游菌釆樣器，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)時(shí)間不少于5min,并檢查流量并根據(jù)采樣量調(diào)整設(shè)定采樣時(shí)間。
（7）關(guān)閉浮游菌采樣器，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子。
（8）置采樣口于采樣點(diǎn)后，開啟浮游菌采樣器進(jìn)行采樣。
2.培養(yǎng)
（1）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（2）采用大豆酩蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA)配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后,，在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d；采用沙氏培養(yǎng)基(SDA)配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在20℃~25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于5d。
（3）每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。
3.菌落計(jì)數(shù)
（1）用肉眼對(duì)培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。
（2）若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。
4.注意事項(xiàng)
（1）使用前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。
（2）對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。
（3）由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。
測(cè)試條件
在測(cè)試之前，要對(duì)潔凈室(區(qū))相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測(cè)試，這類測(cè)試將會(huì)提供測(cè)試懸浮粒子的環(huán)境條件，例如:這種預(yù)先測(cè)試或可包括:
1.溫度和相對(duì)濕度的測(cè)試。潔凈室(區(qū))的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)(無特殊要求時(shí)，溫度在18℃~26℃，相對(duì)濕度在45%~65%為宜)，同時(shí)應(yīng)滿足測(cè)試儀器的使用范圍。
2.室內(nèi)送風(fēng)量或風(fēng)速的測(cè)試，或壓差的測(cè)試。
3.高效過濾器的泄漏測(cè)試。
測(cè)試狀態(tài)
1.靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試。
2.靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人。
3.浮游菌測(cè)試前，被測(cè)潔凈室(區(qū))由用戶決定是否需要預(yù)先消毒。
4.測(cè)試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測(cè)試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內(nèi)測(cè)試人員數(shù)。
測(cè)試時(shí)間
1.在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室(區(qū))而言，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始。對(duì)非單向流潔凈室(區(qū))，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。在靜態(tài)b測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室(區(qū))，測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過10min自凈后開始；對(duì)非單向流潔凈室(區(qū))，測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過20min自凈后開始。
2.在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。
